Quando si tratta di imaging IR di campioni biologici, una delle tecniche più efficaci è la tecnica ditecnica Nujol mull. Questo metodo prevede la preparazione del campione biologico sminuzzandolo in una polvere fine e mescolandolo poi con il Nujol, un tipo di olio minerale. La miscela viene poi spalmata in modo sottile su lastre di sale, tipicamente di KBr o NaCl, che sono trasparenti alla radiazione IR. Infine, il campione viene posto nel percorso di un raggio IR per l'analisi spettroscopica.
Quale tecnica potrebbe essere utilizzata per l'imaging IR di campioni biologici? (4 passi per padroneggiare la tecnica Nujol Mull)
1. Preparazione del campione
Il primo passo della tecnica Nujol Mull è la preparazione del campione biologico. Ciò comporta la macinazione del campione, che può essere costituito da tessuti, cellule o altri materiali biologici, in una polvere fine. L'obiettivo è ridurre la dimensione media delle particelle a circa 1 o 2 micron. In questo modo si garantisce che le particelle siano abbastanza piccole da trasmettere efficacemente la luce IR.
2. Miscelazione con Nujol
Successivamente, il campione finemente macinato viene mescolato con il Nujol, un tipo di olio minerale. Il Nujol agisce come un agente di miscelazione, aiutando a formare una pasta omogenea con il campione in polvere. Uno dei vantaggi dell'uso del Nujol è che non assorbe significativamente nella regione IR. Ciò consente di osservare chiaramente lo spettro del campione biologico.
3. Applicazione su piastre di sale
La miscela Nujol-campione viene quindi applicata su una faccia di una piastra KBr o NaCl. Un'altra piastra viene posizionata sopra e la miscela viene distribuita uniformemente tra le piastre con un leggero movimento di sfregamento. La pellicola risultante dovrebbe essere leggermente traslucida e priva di bolle, il che indica una preparazione adeguata.
4. Analisi IR
Infine, il campione preparato viene analizzato con uno spettrometro IR. La radiazione IR attraversa il film sottile e l'assorbimento di specifiche lunghezze d'onda da parte delle molecole biologiche fornisce informazioni sulla loro struttura e sui gruppi funzionali.
Questo metodo è particolarmente adatto per i campioni biologici perché consente di analizzare campioni non facilmente solubili o che potrebbero degradarsi in soluzione. La tecnica Nujol mull è semplice, relativamente veloce e non richiede attrezzature costose, rendendola accessibile a diversi ambienti di laboratorio.
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